Содержание страницы
Формирование бластоцисты
Первая неделя после оплодотворения является критически важной для развития эмбриона. В этот период он проходит через несколько сложных процессов, результаты которых существенно влияют на успех переноса эмбриона и наступление беременности. За 7 дней эмбрион проходит стадии появления и слияния пронуклеусов (ядер яйцеклетки и сперматозоида, формирующих ядро зиготы), дробления, компактизации и формирования бластоцисты.
Бластоциста формируется на 5–7 день развития эмбриона и состоит из 156–200 клеток. Она включает полость (бластоцель) и две популяции плюрипотентных клеток: внутренняя клеточная масса (ВКМ) и трофэктодерма (ТЭ). В дальнейшем ВКМ дает начало всем типам клеток эмбриона, а ТЭ формирует плаценту.
Классификация и отбор бластоцист для переноса эмбрионов
Для международной классификации бластоцист используется шкала Гарднера, которая включает одну цифру и две заглавные буквы. Цифра обозначает размер полости бластоцисты, первая буква — качество ВКМ, а вторая — качество ТЭ. Под микроскопом эмбриологи оценивают качество бластоцист по их морфологии.
Размер бластоцисты и объем бластоцели (1–6):
- Полость занимает <50% бластоцисты.
- Полость занимает 50% бластоцисты.
- Полость занимает >75% бластоцисты.
- Полость бластоцисты в 2 раза больше внутренней клеточной массы.
- Бластоциста начинает выходить из оболочки (хетчинг).
- Бластоциста полностью освобождена от оболочки и готова к имплантации.
Рис. 1. Очень ранняя бластоциста с маленькой полостью в центре.
Рис. 2. Ранняя бластоциста с хорошо заметной полостью, занимающей половину объема эмбриона.
Рис. 3. Бластоциста, полость которой занимает более 50% объема эмбриона. Общий объем бластоцисты остается неизменным без истончения блестящей оболочки (zona pellucida, ZP). Раннюю ВКМ можно увидеть в верхней части этого изображения.
Рис. 4. Бластоциста с полостью, в два раза превышающей внутреннюю клеточную массу (ВКМ). ВКМ состоит из множества клеток, которые плотно упакованы.
Рис. 5. Начало хетчинга (выхода) в бластоцисте: маленькая треугольная ВКМ выходит вместе с клетками ТЕ. Полость бластоцисты выстилается большим количеством TE-клеток одинакового размера, а ZP истончена.
Рис. 6. Бластоциста после хетчинга, свободная от блестящей оболочки (ZP). ВКМ немного вне фокуса на этом изображении и состоит из множества клеток. TE также состоит из множества клеток, которые образуют когезивный эпителий. В ZP выброшено некоторое клеточное мусор.
Качество внутренней клеточной массы (ВКМ) (будущий плод):
— A: Клеток много, границы между ними неразличимы.
— B: Клетки различимы, присутствуют незначительные дефекты (фрагментация).
— C: Значительные дефекты клеток, признаки апоптоза (гибели клеток).
— D: Дегенерированные клетки.
Рис. 7. Бластоциста (4AA) с большой ВКМ, состоящей из множества клеток и хорошо компактизированной.
Рис. 8. Бластоциста (3BA) с очень маленькой ВКМ, которая состоит лишь из нескольких клеток.
Рис. 9. Бластоциста (качество 3BB) без четко идентифицируемой ВКМ и с тонкой TE.
Рис. 10. Бластоциста, в которой начинается хетчинг (4BA) без четко идентифицируемой ВКМ, но с TE, состоящей из множества клеток, образующих когезивный эпителий. На этом изображении темные дегенерированные клетки присутствуют в правой части рисунка.
Качество клеток трофэктодермы (ТЭ) (будущей плаценты):
— A: Клеток много, они расположены в одном плотном слое.
— B: Клеток немного меньше или они распределены неравномерно.
— C: Клеток мало, отмечаются дефекты или включения.
— D: Признаки дегенерации.
Рис. 11. Бластоциста, которая начинает выходить из блестящей оболочки (5AA) с множеством клеток, образующих трофоэктодерму (ТЕ). ВКМ заметна через разрыв в ZP.
Рис. 12. Бластоциста (5AB) с несколькими TE-клетками, которые образуют слабо связанный эпителий, и ВКМ в верхней части изображения.
Рис. 13. Ранний хетчинг бластоцисты (5AC) с очень тонкой ТЕ, клетки которой не образуют когезивного эпителия, ВКМ хорошо визуализирована в левой верхней части рисунка.
Рис. 14. Хетчинг бластоцисты (5CC). Клетки ТЕ различаются по размеру и не образуют когезивного эпителия. На этом изображении в правой нижней части можно увидеть несколько слабо соединенных клеток ВКМ. Внутри бластоцисты есть несколько темных дегенеративных очагов.
Бластоцисты высокого качества (AA/AB/BA) имеют значительно более высокие показатели успешной имплантации и рождения детей, чем бластоцисты среднего (BB/CB) или низкого качества (BC/CC). Бластоцисты среднего качества также могут успешно имплантироваться и развиваться. Однако бластоцисты низкого качества обычно обладают недостаточной энергетической потенцией и не рассматриваются для переноса.
Влияние женского репродуктивного возраста и морфологии эмбрионов на частоту живорождений после переноса бластоцист без биопсии и проведения преимплантационного генетического тестирования (ПГТ)
В исследовании 2015 года оценивали результаты переноса бластоцист у женщин в возрасте 40–44 лет в зависимости от количества и качества перенесенных эмбрионов:
- 21,2% бластоцист категории «A» привели к рождению детей (p < 0,0001).
- 10,5% бластоцист категории «B» привели к рождению детей (p = 0,001).
- 5,6% бластоцист категории «C» показали положительные результаты (p = 0,056).
- Эмбрионы категории «D» не оказали существенного влияния (p = 0,71).
Среди 80 переносов, где лучшими эмбрионами были морулы, родилось 3 ребенка (3,8%). Интересно, что перенос хотя бы одной бластоцисты высокого качества значительно повышал вероятность рождения ребенка. Однако перенос нескольких бластоцист, независимо от их качества, увеличивал риск многоплодной беременности.
В исследовании 2021 года морфология ТЭ оказалась лучшим предиктором уровня живорождения, чем морфология ВКМ. Для женщин младшей возрастной группы (25–32 года) частота живорождений на один перенос составляла:
— 51% для бластоцист высокого качества (AA/AB/BA).
— 39% для среднего качества (BB/CB).
— 25% для низкого качества (BC/CC).
Для женщин старшей возрастной группы (40–44 года) эти показатели составили:
— 22% для бластоцист высокого качества.
— 14% для среднего качества.
— 8% для низкого качества.
Влияние криоконсервации на качество эмбрионов
Криоконсервация обычно не оказывает негативного влияния на качество эмбрионов. Процесс проходит быстро (витрификация) с добавлением криопротекторов, которые защищают клетки эмбриона от повреждений при замораживании. Эмбрион быстро погружают в жидкий азот, что предотвращает образование ледяных кристаллов и повреждение биоматериала. Однако иногда при размораживании качество эмбрионов может ухудшаться. Повторное замораживание (рекриоконсервация) уже может быть неблагоприятным для эмбрионов.
Выводы
Качество бластоцист — важный критерий для отбора эмбрионов для переноса. Бластоцисты высокого качества имеют значительно более высокие показатели успешной имплантации и рождения детей по сравнению с эмбрионами среднего и низкого качества. Однако эмбрионы среднего качества также имеют шансы на успешную имплантацию и рождение ребенка.
Репродуктивный возраст женщины играет ключевую роль в снижении эффективности имплантации даже для эмбрионов высокого качества из-за увеличения риска хромосомных нарушений (анеуплоидий). Классификация бластоцист по Гарднеру оценивает только их морфологию, что не всегда достаточно в конкретном случае. Для более комплексной оценки качества эмбрионов и выбора хромосомно здоровых (эуплоидных) эмбрионов, в зависимости от медицинской истории, репродуктолог может рекомендовать провести преимплантационное генетическое тестирование (PGT-A).
Использованные источники:
- Richter, K. S., O’Brien, J. E., Tucker, M. J., & Stillman, R. J. (2015). Blastocyst transfer in women aged 40 years or older: how many is too many? Fertility and Sterility, 104(3), e58. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2015.07.175
- Awadalla, M., Kim, A., Vestal, N., Ho, J., & Bendikson, K. (2021). Effect of Age and Embryo Morphology on Live Birth Rate After Transfer of Unbiopsied Blastocysts. JBRA Assisted Reproduction, 25(3), 373. https://doi.org/10.5935/1518-0557.20200101
- https://atlas.eshre.eu/ – Atlas of human embryology.
